Ejercicio resuelto de Biología · 2022

Bloque 4: GENÉTICA Y EVOLUCIÓN, EL MUNDO DE LOS MICROORGANISMOS Y SUS APLICACIONES. BIOTECNOLOGÍA. LA INMUNOLOGÍA Y SUS APLICACIONES. Se deberá escoger TRES de las siguientes ocho cuestiones (3 puntos):

4.5. Explique cómo se construye un ADN recombinante (1 punto).

$\mathbf{\text{Explique}}\mathbf{\text{c}}\acute{\mathbf{\text{o}}}\mathbf{\text{mo}}\mathbf{\text{se}}\mathbf{\text{construye}}\mathbf{\text{un}}\mathbf{\text{ADN}}\mathbf{\text{recombinante}}\mathbf{\text{(1}}\mathbf{\text{punto).}}$

Un ADN recombinante es una molécula de ADN que combina secuencias procedentes de organismos distintos. Su construcción sigue cuatro pasos.



El primer paso es aislar el gen de interés. Puede obtenerse cortando el ADN del organismo donante con enzimas de restricción, sintetizándolo químicamente si se conoce su secuencia, o fabricándolo a partir de su ARN mensajero mediante la transcriptasa inversa, lo que da el llamado ADN complementario, ya libre de intrones y por ello adecuado para expresarlo en una bacteria.

El segundo paso es cortar el gen y el vector con la misma enzima de restricción. El vector suele ser un plásmido bacteriano, y lo esencial es que la enzima sea la misma en ambos casos: al reconocer la misma secuencia diana, produce en los dos el mismo tipo de corte y deja extremos monocatenarios idénticos, los llamados extremos cohesivos o pegajosos.

El tercer paso es la unión. Al mezclar el gen y el vector abiertos, sus extremos cohesivos son complementarios y se aparean espontáneamente por puentes de hidrógeno. Esa unión es todavía débil, de modo que interviene la ADN ligasa, que sella los enlaces fosfodiéster del esqueleto y cierra covalentemente la molécula. Ya se tiene el ADN recombinante, en este caso un plásmido recombinante.

El cuarto paso es introducir el vector en una célula hospedadora, habitualmente una bacteria, por transformación. Al multiplicarse esa bacteria, replica el plásmido con ella y produce millones de copias idénticas del gen, es decir, lo clona, y puede además expresarlo y fabricar la proteína que codifica. Para distinguir las bacterias que han incorporado el plásmido se emplean los genes marcadores que este lleva, normalmente de resistencia a un antibiótico: basta cultivarlas en un medio con ese antibiótico para que solo crezcan las transformadas.