Ejercicio resuelto de Biología · 2025

La Junta de Andalucía toma nuevas medidas para hacer frente al Virus del Nilo, determinando que se harán pruebas PCR a las personas que acudan a urgencias con síntomas compatibles con el virus. (Fuente: www.lavozdigital.es, 2025).

a) ¿Cuál es la importancia de utilizar una ADN polimerasa termoestable en la técnica PCR?
b) Si tuvieras que poner a punto esta técnica para una investigación, ¿qué aspectos fundamentales debes tener en cuenta a la hora de diseñar los cebadores?
c) ¿Puede resultar útil el empleo de la técnica PCR en medicina forense? Razona tu respuesta.

$\mathbf{\text{a)}}\mathbf{\text{¿Cu}}\acute{\mathbf{\text{a}}}\mathbf{\text{l}}\mathbf{\text{es}}\mathbf{\text{la}}\mathbf{\text{importancia}}\mathbf{\text{de}}\mathbf{\text{utilizar}}\mathbf{\text{una}}\mathbf{\text{ADN}}\mathbf{\text{polimerasa}}\mathbf{\text{termoestable}}\mathbf{\text{en}}\mathbf{\text{la}}\mathbf{\text{t}}\acute{\mathbf{\text{e}}}\mathbf{\text{cnica}}\mathbf{\text{PCR?}}$

Porque en cada ciclo la mezcla se calienta hasta unos $95{}^{\circ }C$ para separar las dos hebras del ADN, y una polimerasa corriente se desnaturalizaría en ese paso. Al emplear una enzima procedente de una bacteria termófila, como la Taq polimerasa de $\mathit{\text{Thermus}}\mathit{\text{aquaticus}}$, la enzima resiste esas temperaturas y sigue activa ciclo tras ciclo. Eso evita tener que añadir enzima nueva cada vez y es lo que permitió automatizar por completo la técnica en un termociclador.

$\mathbf{\text{b)}}\mathbf{\text{Si}}\mathbf{\text{tuvieras}}\mathbf{\text{que}}\mathbf{\text{poner}}\mathbf{\text{a}}\mathbf{\text{punto}}\mathbf{\text{esta}}\mathbf{\text{t}}\acute{\mathbf{\text{e}}}\mathbf{\text{cnica}}\mathbf{\text{para}}\mathbf{\text{una}}\mathbf{\text{investigaci}}\acute{\mathbf{\text{o}}}\mathbf{\text{n,}}\mathbf{\text{¿qu}}\acute{\mathbf{\text{e}}}\mathbf{\text{aspectos}}\mathbf{\text{fundamentales}}\mathbf{\text{debes}}\mathbf{\text{tener}}\mathbf{\text{en}}\mathbf{\text{cuenta}}\mathbf{\text{a}}\mathbf{\text{la}}\mathbf{\text{hora}}\mathbf{\text{de}}\mathbf{\text{dise}}\widetilde{\mathbf{\text{n}}}\mathbf{\text{ar}}\mathbf{\text{los}}\mathbf{\text{cebadores?}}$

Los cebadores han de ser complementarios de los extremos de la región que se quiere amplificar, uno de cada hebra y orientados de manera que la síntesis avance hacia el interior del fragmento.

Deben ser lo bastante largos, del orden de veinte nucleótidos, para que la secuencia sea única en el genoma y no hibriden en otros lugares, y los dos deben tener una temperatura de fusión parecida, lo que se consigue con un contenido semejante y equilibrado de guanina y citosina, para que ambos se unan en el mismo paso de hibridación.

Por último, no deben ser complementarios entre sí ni consigo mismos, porque formarían dímeros u horquillas y se agotarían sin amplificar nada.

$\mathbf{\text{c)}}\mathbf{\text{¿Puede}}\mathbf{\text{resultar}}\acute{\mathbf{\text{u}}}\mathbf{\text{til}}\mathbf{\text{el}}\mathbf{\text{empleo}}\mathbf{\text{de}}\mathbf{\text{la}}\mathbf{\text{t}}\acute{\mathbf{\text{e}}}\mathbf{\text{cnica}}\mathbf{\text{PCR}}\mathbf{\text{en}}\mathbf{\text{medicina}}\mathbf{\text{forense?}}\mathbf{\text{Razona}}\mathbf{\text{tu}}\mathbf{\text{respuesta.}}$

Sí, y es una de sus aplicaciones más conocidas. En el lugar de un suceso las muestras suelen ser mínimas y estar degradadas: una gota de sangre, un cabello, restos de saliva. La PCR permite partir de esa cantidad ínfima de ADN y obtener millones de copias de determinadas regiones muy variables entre individuos, con las que se construye el perfil genético.

Ese perfil se compara después con el de los sospechosos o con el de una base de datos, y sirve igualmente para identificar restos humanos o para establecer relaciones de parentesco.